TINCIÓN DE GRAM
Procedimiento:
1.- Fijado de muestra
2.- Cristal violeta 3'
3.- Lavado
4.- Lugol 3'
5.- Lavado
6.- Alcohol acetona 3''
7.- Lavado
8.- Safranina 3'
9.- Lavado
10.- Secado de los lados y por la parte de abajo
11.- Observación desde 4x hasta 100x (éste con aceite de inmersión)
Fundamento:
1.- Cristal violeta.- Colorante base agua con afinidad para NAG y NAM. Sólo tiñe Gram positivos ya que los negativos poseen membrana externa impermeable
2.- Lugol.- Fijador que precipita el primer colorante
3.- Alcohol acetona.- Retira el exceso de colorante en Gram positivos y en negativos desnaturaliza la membrana externa y forma poros
4.- Safranina colorante base agua con afinidad para NAG y NAM que sólo tiñe a negativos ya que positivos tienen su lugares de unión ya ocupados
viernes, 27 de agosto de 2010
PARED CELULAR BACTERIANA
Diferencias entre Gram positivos y negativos
Conceptos básicos:
Todas las bacterias de importancia médica (no en estado latente de espora) poseen citoplasma y membrana citoplasmática
Casi todas las bacterias de importancia médica poseen pared celular.
La pared celular se encuentra por arriba (superior) de la membrana citoplasmática
La pared celular recibe diversos sinónimos: Mureina, Ácido Murámico, Péptidoglican y Mucopéptido.
Sólo algunas bacterias de importancia médica poseen una cápsula, tal que no permita la correcta tinción de la bacteria por medio de Gram y que cumpla funciones antifagocíticas.
Más externa a la pared celular se encuentra la cápsula, esta puede ser de carbohidratos (glicoproteínas) o de ceras
Cápsula de carbohidratos: Ej. Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis y Haemophilus influenzae.
Cápsula de ceras: Ej. Mycobacterium tuberculosis.
Diferencias:
La pared celular de Gram positivos es más gruesa que la de negativos
La pared de Gram positivos posee ácido teicoico, ácido teicurónica y ácido lipoteicoico
La pared celular de Gram negativos no posee estos ácidos pero si presenta una membrana externa
Las bacterias Gram negativas poseen –en su membrana externa – el LPS (lipopolisacárido) o endotoxina
El LPS se divide en tres regiones: Lípido A (poder toxigénico), región central (KDO) y antígeno O (especificidad de especie)
Similitudes:
Ambos poseen N Acetilglucosamina y N Acetil murámico
Estas dos moléculas se encuentran entrelazadas por un enlace b1-4
Diferencias entre Gram positivos y negativos
Conceptos básicos:
Todas las bacterias de importancia médica (no en estado latente de espora) poseen citoplasma y membrana citoplasmática
Casi todas las bacterias de importancia médica poseen pared celular.
La pared celular se encuentra por arriba (superior) de la membrana citoplasmática
La pared celular recibe diversos sinónimos: Mureina, Ácido Murámico, Péptidoglican y Mucopéptido.
Sólo algunas bacterias de importancia médica poseen una cápsula, tal que no permita la correcta tinción de la bacteria por medio de Gram y que cumpla funciones antifagocíticas.
Más externa a la pared celular se encuentra la cápsula, esta puede ser de carbohidratos (glicoproteínas) o de ceras
Cápsula de carbohidratos: Ej. Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis y Haemophilus influenzae.
Cápsula de ceras: Ej. Mycobacterium tuberculosis.
Diferencias:
La pared celular de Gram positivos es más gruesa que la de negativos
La pared de Gram positivos posee ácido teicoico, ácido teicurónica y ácido lipoteicoico
La pared celular de Gram negativos no posee estos ácidos pero si presenta una membrana externa
Las bacterias Gram negativas poseen –en su membrana externa – el LPS (lipopolisacárido) o endotoxina
El LPS se divide en tres regiones: Lípido A (poder toxigénico), región central (KDO) y antígeno O (especificidad de especie)
Similitudes:
Ambos poseen N Acetilglucosamina y N Acetil murámico
Estas dos moléculas se encuentran entrelazadas por un enlace b1-4
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